患儿粪便中幽门螺杆菌抗原及血清抗体检测
概要:本研究表明,HpsA检测与金标准比较敏感度、特异度及根治后复查结果与碳13呼气试验检测诊断符合率均较高。
幽门螺杆菌(Hp)是小儿慢性胃炎、十二指肠炎及消化性溃疡的重要病因之一。临床检测Hp的方法较多,传统多采用侵入性内镜检查法,此法准确性、特异性较高,是诊断Hp感染的金标准,但儿童、老人及孕妇难以接受。非侵入性方法有13C尿素呼气试验(13C-UBT)、粪便中Hp抗原(HpSA)检测及血清抗体(Hp-IgG)检查等。本研究通过对153例患儿HpSA、Hp-IgG的检测,与金标准进行了对比分析,并对36例Hp阳性患儿根治后进行了13C-UBT检测,复查了HpSA、Hp-IgG,且进行了对比分析。
一、材料与方法
1.病例选择:因消化道疾病而在我院进行胃镜检查的患儿153例(男98例,女55例),年龄3~14岁,平均年龄8.5岁。已排除3~4周内接受抗生素、质子泵抑制剂、铋剂、H2受体阻滞剂等对Hp检测有影响的药物。胃镜诊断为浅表性胃炎81例,十二指肠球炎49例,十二指肠球部溃疡15例,胃溃疡2例,其他6例。
2. 胃黏膜活检标本Hp的检测:患儿胃窦部取黏膜2块,分别做快速尿素酶试验(RUT)和组织切片改良Giemsa染色查找Hp。两项均阳性确诊为Hp阳性,均阴性为Hp阴性,此为Hp检测金标准。对36例阳性患儿用洛赛克+两联抗生素(氨苄西林或克拉霉素+替硝唑)治疗2周。
3. HpSA的检测:胃镜检查当天,嘱患儿留取粪便送检。试剂盒由北京协和药业有限公司提供,原理为ELISA双抗体夹心法。按说明书进行操作,最后酶标仪比色,波长452run,吸光度(A)值≥0.12为阳性,否则为阴性。
4.Hp-IgG检测:患儿胃镜检查后抽静脉血3ml,分离血清检测。试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供,原理为EUSA法。按说明书操作,最后酶标仪比色,波长452mn,空白管调零,测定管A值≥阴性对照2.1倍者为阳性。
5. 36例Hp阳性患儿根治后复查:治疗结束,停药4周后,再次留取粪便、抽取静脉血,按以上方法进行复检;同时进行13C-UBT检测,作为判断Hp是否被根除的标准。试剂盒由海立克试断试剂所提供。
6. 统计学分析:根治前Hp检测结果以金标准为参照,用四格表评价HpSA、Hp-IgG检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确性。Hp根治复查结果以13C-UBT为参照,计算HpSA、Hp-IgG的根除率及诊断符合率。
二、结果
1.治疗前Hp检测结果:金标准检测结果:阳性85例,阴性68例。其他结果见表1。
表1 3种方法Hp检测结果
方法 |
85例阳性病例根治前 |
68例阴性病例 |
36例阳性病例根治后 |
|||
|
阳性 |
阴性 |
阳性 |
阴性 |
阳性 |
阴性 |
HpSA |
78 7 |
4 |
64 |
6 |
30 |
|
Hp-IgG |
75 |
10 |
2 |
66 |
31 5 |
|
13C-UBT |
- - |
- - |
4 |
32 |
注:-:未检测
以金标准作为Hp感染的诊断标准,HpSA检测的敏感度91.8%(78/85),特异度94.1%(64/68),阳性预测值95.1%(78/82),阴性预测值90.1%(64/71),准确性92.8%(142/153);Hp-IgG检测的敏感度88.2%(75/85),特异度97.1%(66/68),阳性预测值97.4%(75/77),阴性预测值86.8%,(66/76),准确性92.2%(141/153)。
2.Hp根治后检查结果:见表L13C-UBT检测Hp根除率为88.9%,以此为标准,HpSA检测Hp根除率为83.3%,诊断符合率为86.1%;Hp-IgG检测Hp根除率13.9%,诊断符合率为51.4%。
三、讨论
1983年Hp被澳大利亚的Warren和Warshail发现,已确认为最常见的慢性感染性疾病的病原之一。临床检测Hp分侵入性和非侵入性两大类,前者被公认为检测Hp感染的金标准,但某些患者难以接受。后者的13C-UBT检测虽较为准确,但需要质谱分析仪,难以在基层医院推广。本研究表明,HpSA检测与金标准比较敏感度、特异度及根治后复查结果与13C-UBT检测诊断符合率均较高。尽管初次检测有4例假阳性,这可.能与胃内感染灶分布不均、胃黏膜组织取材有限及未能反映全胃情况有关。而定位在胃黏膜上皮细胞表面的Hp随着细胞更新脱落由粪便排出,则能反映全胃情况,4例假阳性,亦不排除真阳性的可能。故HpSA的检测不仅用于Hp感染的检测,还适用于抗Hp根治后的疗效评价,这与其他报道一致[4]。另外此法简便经济、不受患者年龄身体条件的限制、不需特殊仪器,可用于大规模流行病学调查,对特殊人群是较为理想的检查方法,值得在临床推广。
本研究还表明,Hp-IgG检测法与金标准比较亦具有较高的敏感度、特异度,但在根治后复查时,其阳性率仍维持较高水平,与13C-UBT检测诊断符合率仅为5L4%,资料显示Hp根治后血清中Hp抗体滴度可维持阳性超过半年[5],故Hp-IgG检测不能反映现症Hp感染,临床应引起注意。
参考文献
[1]刘凤霖,牛余正,宋华,等儿童幽门螺杆菌感染粪便抗原检测的临床研究.中华儿科杂志,2002,40:557.
[2]陈肖肖,欧弼悠,吴秀英,等.幽门螺杆菌感染患儿克拉霉素三联疗法的远期疗效失败病例再治疗的探讨.中华儿科杂志,2004,42:417420.
[3]唐国荣,梅柏如,张健.无锡地区散居儿童粪便幽门螺杆菌抗原检测结果分析.临床儿科杂志,2003,21:720-722.
[4]林洁,谢鑫友,朱永良,等.粪便幽门螺杆菌抗原测定的临床价值评价.中华检验医学杂志,2002,25:111.
[5]耿岚岚,丘小汕,区文玑,等.儿童粪便幽门螺杆菌抗原检测的临床应用.中国实用儿科杂志,2003,18:687468.
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